产品介绍
DNaseⅠ(脱氧核糖核酸酶Ⅰ),即DeoxyribonucleaseⅠ,是一种可消化单链或双链DNA的脱氧核糖核酸内切酶,它识别并切割磷酸二酯 键,产生5'端为磷酸基团,3'端为羟基的单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸。DNaseⅠ的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子Mg2+、Mn2+等激活。在Mg2+存在的情况下,该酶可随机识别并切割双链DNA任意一条链上的任意位点;而在Mn2+存在的情况下,可识别并切割DNA两条链上几乎相同的位点,产生平末端或有1 - 2个核苷酸突出的粘末端DNA片段。
产品组成
储存条件
-20℃保存,<0℃运输。▲避免反复冻融。
适用范围
适用于RNA提取、体外转录、RT-PCR实验中DNA的去除,DNaseⅠ印迹(DNaseⅠ footprinting),缺口平移 (nick translatioin),DNA随机片段文库构建等分子生物学实验。
注意事项
1. 在使用本品进行RNA样品中DNA的清除实验时,可在反应体系中添加Murine RNase Inhibitor以保护RNA不被降解。
2. 部分实验条件下,DNaseⅠ的 使用量需要通过实验进行调整。
3. 失活或抑制:加入终浓度为5 mM的EDTA并经过65℃加热10 min,或通过酚氯仿抽提可使DNaseⅠ失活。此外,使用金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子,0.1%的SDS,DTT、巯基乙醇等还原剂,50 - 100 mM以上盐浓度均对DNaseⅠ的活性有显著抑制作用。
Note
For research use only .