ECL发光试剂盒:稳定型;增强型;超敏型
ECL发光试剂盒系列说明书
产品介绍
ECL发光试剂盒?于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶(HRP)的抗体、抗原或者核酸。蛋?质或核酸在电泳后转移到
印迹膜上,以HRP标记的抗体或探针结合膜上的?的蛋?或核酸,洗膜后置于?本产品配制的ECL?作液中,室温孵育数分
钟。HRP使?作液中的鲁?诺(Luminol)氧化并发光,试剂中添加的增强剂可以使得这种发光?幅度增强。此光经X光胶?或
电?装置感光,可清晰显?蛋?质或核酸条带。本公司?产的Western萤光检测试剂?前共有三种,分别是稳定型,增强型和
超敏型。常规的Western检测,优先推荐使?增强型。对于丰度?较?的?的蛋?的检测,例如内参蛋?等的检测,推荐使?
性价?更?的稳定型。对于低丰度较难检测的?的蛋?,优先推荐使?检测灵敏度最?的超敏型。
产品?途
?于免疫印迹实验可视化检测蛋?质的发光显?液。
产品特点
1.发光性能强:超敏型发光性能为其它品牌的2~4倍;
2.灵敏度?:超敏型检测下限可达?克级;
3.稳定性?:
37oC?浴孵育30天,和4oC保存的试剂相?,对样品的检测效果?明显差异。
使??法
1.执?常规电泳、转膜、HRP标记抗体或者HRP标记核酸探针孵育、洗膜;
【注:ECL发光液是HRP的显?底物,因此检测系统最终必须基于HRP酶标记抗体或者核酸探针。】
2. ?次洗膜的同时,新鲜配制发光?作液:分别取等体积的SolutionA和SolutionB,混匀后,室温放置备?;
【注:取SolutionA和SolutionB?定要?不同的枪头。】
3.?平头镊取出膜,搭在滤纸上沥?洗液,勿使膜完全?燥。将膜完全浸?发光?作液(100~200 μL发光?作液/cm
2
膜)中,与发光?作液充分接触。室温孵育3~5分钟,准备?即压?曝光;
【注:孵育时间过?不会增加灵敏度,有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应,使?过少的发光?作液
不利反应进?,也会导致膜上条带曝光不均和明显 降低灵敏度。为达节约?的可将膜剪?,但勿降低发光液使??例。】
4.?平头镊?夹起膜,膜的下缘轻轻接触吸?纸,去除膜上多余的液体,留下少量?作液,不可让膜完全?燥。不可洗去
发光液;
5.在X光胶?暗盒内表?铺?张?积?于膜的保鲜膜。将印迹膜贴在保鲜膜上,将保鲜膜折起来完全包裹印迹膜,去除
?泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜。?滤纸吸去多余的发光?作液。?胶带将覆盖印迹膜的保鲜膜固定在暗盒内,蛋
?带?向上;
6.暗房内取?张X光胶??于包裹的膜上,压?,分别曝光不同的时间,如数秒到数分钟,定影显影冲洗;
【注:曝光时间需根据曝光强度做相应的调整。若是背景过?,可使?两张X光胶?同时压?。】
7.叠氮化钠(NaN3
)能抑制HRP活性,应避免使?NaN3,如必须使?,浓度不要超过0.01%;
8.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴?次性?套操作;戴?套可以避免在膜上留下?印,保持膜的?净;
9.本产品仅供研究使?
储存条件
避光保存,室温可保持稳定24个?以上;?期不?,建议置于4oC保存,延?有效期。
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