储存条件

-20℃避光保存，有效期见外包装。可以采用pH7.4的10 mM Tris溶解后，分装保存，避免反复冻融。

-20℃避光保存，有效期见外包装。可以采用 pH7.4 的 10 mM Tris 溶解后，分装保存，避免反复冻融。

使用方法

DNA 标记

1. 试剂（自备）

（1）Taq DNA 聚合酶

（2）10× Taq reaction buffer

（3）25 mM MgCl2

（4）dATP, dTTP, dCTP, dGTP (单独溶液), 1 mM each （5）DNA 模板

（6）正向、反向引物，10 μM each （7）PCR 清洁试剂盒

2. PCR 反应

（1）先按照表 1 反应体系配制 PCR 反应混合液

（2）再在每个反应管加 1μL 1mM YF® dye dUTP 染料 注：阴性对照管，加 1 μL 1mM dTTP 代替 YF® dye dUTP

（3）按照表 2 程序运行 PCR 反应

注：a. 热变性时间依据不同的 Taq 酶进行调整；

b. 退火温度设置：Tm - 5℃；

c. 延伸时间根据扩增片段大小而定，一般 200 - 300 bp 片段设为 1 min 即可。

（4）可选步骤。用 PCR 清洁试剂盒去除未掺入的单核苷酸。

（5）取 10%的 PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳（凝胶不加入DNA 染料），检测 PCR 反应的效率和特异性，通过紫外凝 胶成像仪或激光凝胶扫描仪观察。其中远红外染料（波长 ≥650 nm），肉眼无法观察。 注：凝胶染色前先观察 YF®染料的荧光，以免与下一步的凝 胶染料发生荧光淬灭。 (6) 采用后染法，使用 DNA 凝胶染料对凝胶进行染色，观 察总的 PCR 产物或阴性对照组的 PCR 扩增产物。 TUNEL 法检测细胞凋亡 注：我司提供了一系列 YF® Dye TUNEL Assay Kits，试剂盒 组分包括：平衡缓冲液、反应缓冲液和 TdT 酶等。

Note: For research use only