产品名称
T5 核酸外切酶 (T5 Exonuclease)
产品概述
T5 核酸外切酶沿 5’-3’方向降解 DNA,它可降解双链DNA、单链 DNA 和缺刻的质粒 DNA。它既能从 5’-末端起始降解 DNA,也能从线性或环状双链 DNA 的切刻或缺口处起始降解 DNA,但不能降解超螺旋双链 DNA。基于以上特性,T5 核酸外切酶可应用于Gibson 组装。
保存条件
-30 ~ -15℃保存。运输条件:≤0℃。
单位定义
1 单位指在 50 μl 反应体系,37°C 条件下,30分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 1 nmol 的酸可溶性脱氧核糖核苷酸所需要
的酶量。
注意事项
(1)1×T5 Exo Buffer:50mM KAc,20mM Tris-Ac pH 7.9,10mM Mg(Ac)2,1mM DTT。该酶在PCR Buffer 中也具有活性。
(2)该酶的最佳反应温度为 37°C,在 50°C 也具有一定活性,因此可用于Gibson组装。
使用 方法
1.建立如下反应体系
模板 DNA 1 μg
10×T5 Exo Buffer 5 μl
T5 Exonuclease (10 U/μl) 1 μl
ddH2O upto 50 μl
2. 37°C,30min。
3. 加入 EDTA 至总浓度为 11mM,终止反应。
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