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产品简介
Cas14a1 核酸酶是一种内切核酸酶，其在 tracrRNA:crRNA（或 sgRNA）的引导下，特异结合并切 割靶标 ssDNA，且无需 PAM 位点。相比于其他的 Cas 蛋白，Cas14 蛋白的分子量普遍较小（400- 700AA），其中，本公司提供的 Cas14a1 的分子量仅为为 64.9 kd（含有 3.4 k 的 N 端标签序列）。 与 Cas12 类似，Cas14a1 也可以结合靶标核酸并激活其 ssDNA 反式切割活性，从而被应用于靶标核 酸的分子检测。然而，与 Cas12 不同的是，Cas14a1 只能结合 ssDNA 靶标，因此：经过扩增富集的 靶标核酸需使用 T7 核酸外切酶进行处理，且其中一条扩增引物需要实验磷硫酰化修饰以确保 T7核 酸外切酶仅切割其中一条链，从而留下 ssDNA 靶标链以用于 Cas14a1 介导的分子检测。更详细的 信息可参见论文（PMID: 30337455）。
产品组成
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产品货号 |
CS32119-01 |
CS32119-02 |
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Cas14a1 Nuclease |
100 pmol (10 pmol/μL) |
1000 pmol (10 pmol/μL) |
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10× Cas14 Buffer |
1 mL |
1 mL ×2 |
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Control Target ssDNA (1 μM) |
5 μL |
5 μL |
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Control tracrRNA:crRNA (10 μM) |
5 μL |
5 μL |
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ssDNA reporter (FAM-HBQ1) (10μM) |
5 μL |
5 μL |
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组分 |
体积 |
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10× Cas14 Buffer 10 μM tracrRNA:crRNA 10 μM Cas14a1 Nuclease 1 μM Target ssDNA 10 μM ssDNA reporter Nuclease-free water up to |
2μL 1-2 μL 0.5 μL 0.5-1 μL 0.5 μL 20 μL |
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在冰水浴上混合后，利用荧光定量PCR仪或荧光酶标仪进行检测。Control中的ssDNA reporter为FAM荧光标记。若靶标核酸为扩增的双链DNA，则需在体系中添加T7核酸外切酶。 |
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