产品概述
本制品T7 RNA Polymerase (T7 RNA聚合酶)为重组E.coli表达的噬菌体T7 DNA编码的蛋白,是一种高度特异性识别T7启动子序列的DNA依赖的5'→3' RNA聚合酶。本制品以含有T7启动子序列的单链或双链DNA为模板,NTP为底物,合成与启动子下游的单链DNA或双链DNA模板链互补的RNA。
适用场景
1.合成单链RNA,包括mRNA,siRNA,gRNA等各类RNA的前体。
2.合成标记或未标记的高特异性RNA探针。
3.利用帽子类似物合成加帽的mRNA。
保存、运输条件
-30 ~ -15℃保存,≤0°C运输。
注意事项
1. 模板DNA的纯度对体外转录反应至关重要。质粒DNA抽提过程中引入的RNase A残留会显著影响转录RNA的质量,建议使用OD260/280
为1.8 - 2.0的高纯度RNase-free质粒。
2. 模板DNA可通过线性化环状质粒或PCR获得。模板DNA上游需含有T7启动子序列,下游为平末端或编码链5'末端突出。
3. 反应体系中可添加RNA酶抑制剂(BOLAZ #RT0911)防止RNase污染,建议使用浓度1 - 2 U/μl。
4. 反应体系中添加无机焦磷酸酶可显著提高转录产量。
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