产品展厅
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产品概述
Murine RNase Inhibitor是在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂，可通过非竞争方式1:1与RNase A、B或C结合，从而抑制三种酶的活性，保护RNA不被降解。Murine RNase Inhibitor是基于热稳定性的RNase抑制剂，即使使用热稳定性逆转录酶的条件下也具有抑制
活性，与各种商业化Reverse Transcriptase和DNA Polymerase兼容。
产品组分
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组 分 |
RT0911 （10,000 U） |
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Murine RNase Inhibitor (40 U/μl) |
250 μl |
保存条件
-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。
适用场景
本品可在任何可能存在RNase干扰的应用中使用，以避免RNA降解，如：
1. cDNA第一链合成，RT-PCR(PCR及qPCR系统中均可使用)。
2. 在体外转录/翻译(如病毒体外复制体系)中对RNA进行保护。
3. 在RNA分离纯化过程中抑制RNase的活性。
4. RNase保护实验。
单位定义
抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
RNase A的活性通过抑制Cyclic 2', 3'-CMP水解生成3'-CMP定量测定。
注意事项
1. 抑制剂的活性温度为25 ~ 55℃，在65℃及以上温度下失活。
2. 抑制RNase活性的pH值范围较广(pH 5.0 - 9.0均有活性)，在pH 7.0 - 8.0时表现最大活性。
3. 起泡或剧烈搅拌(Vortex等)会引起失活。
4. 不抑制RNase H及RNase T1活性。
实验流程
1. 在RNase-free离心管中配制如下混合液：
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RNase-free ddH2O |
to 20 μl |
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5 × Reverse Buffer |
4 μl |
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dNTP Mix (10 mM each) |
1 μl |
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dNTP Mix (10 mM each) |
1 μl |
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Murine RNase Inhibitor (40 U/μl) |
1 μl |
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Reverse Transcriptase (200 U/μl) |
1 μl |
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模板RNA |
10 pg - 2.5 μg |
2. 轻轻混匀。
3. 50℃ 45 min， 70℃ 15 min。
4. 产物于-20℃保存。
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