产品名称：核黄 [Hoechst S769121]神经元示踪染料

CAS：74681-68-8

规格：25mg

储存条件：-20℃干燥

保质期：24个月

产品物理化学光谱特性

分子量：651.01

外观：亮黄色粉末

溶剂：水或DMSO

激发波长(nm)：355

发射波长(nm)：495

产品介绍

Hoechst染料是一系列荧光染料，用于标记荧光显微镜和流式细胞仪中使用的DNA。因为这些荧光染色标记DNA，它们也常用于可视化细胞核和线粒体。通常使用这些密切相关的双苯并酰亚胺中的两种，Hoechst 33258和Hoechst 33342。两种染料都被约350nm的紫外光激发，并且都发射蓝/青色荧光，发射最大值为461nm。 Hoechst染色剂可以与活细胞或固定细胞一起使用，并且通常用作另一种核酸染色剂DAPI的替代物。它们之间的关键区别在于Hoechst 33342的额外乙基使其更具亲脂性，因此更容易穿过完整的细胞膜。在某些应用中，Hoechst 33258的渗透性明显低于Hoechst 33342.这些染料也可用于通过绘制标准的发射 - 含量曲线来检测样品DNA的含量。

长波示踪剂核黄通常与流行的逆行示踪剂True Blue结合用于双色神经元映射。在神经元细胞中，核黄色主要用黄色荧光染色细胞核，而真正的蓝色是紫外光可激发的二价阳离子染料，用蓝色荧光染色细胞质。当进行免疫组织化学处理时，核黄色和真蓝色都是稳定的，并且可以用于将DAB光转化成不溶的电子致密反应产物。 Hoechst 33258，Hoechst 33342和Nuclear Yellow，当通过轴突逆行运输到它们的亲本细胞体时，可以迁移出轴突和细胞体，如相邻神经胶质细胞核的荧光所示。发现这种迁移在切片在水中储存期间在体内和体外都发生。当使用1％浓度的示踪剂时，可以通过限制存活时间来控制体内迁移。可以通过材料的快速组织学处理来防止体外迁移。

染色细胞分析方案

以下程序适用于大多数细胞类型。 生长培养基，细胞密度，其他细胞类型的存在和其他因素可能影响染色。 玻璃器皿上的残留洗涤剂也可能影响许多生物的染色，导致在有或没有细胞存在的溶液中出现明亮染色的物质。

1）通过离心沉淀细胞

2）将细胞重悬于缓冲溶液或培养基中，在pH7.4下具有最佳染料结合。

3）在盖玻片或细胞培养孔中原位染色贴壁细胞。

4）使用0.5和5uM之间的浓度添加Hoechst染色剂。

5）孵育细胞15至60分钟。

注意：孵育时间和染料浓度需要通过实验测试。在最初的实验中，最好在整个建议范围内尝试几种染料浓度，以确定产生最佳染色的浓度。

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